鸡白痢沙门氏菌的确诊与综防,蛋鸡沙门氏菌病的归结防治

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山西省临汾地区某肉种场2009 年10 月份饲养的一批商品肉鸡共5000 只,5
日龄前饮水中加预防量的环丙沙星和多种维生素,肉鸡生长良好。8日龄后鸡群中有发出喘鸣音,张口呼吸等呼吸困难症状,并且拉白粪,泄殖腔周围羽毛被粪便污染,发病鸡只逐日增多,每天增加500
只左右。养殖场主用诺氟沙星、氨苄青霉素、青霉素、链霉素等饮水治疗,不见好转,发病鸡只达到了3000
多只,养殖场主带了十几只病、死鸡来我所就诊。
临床观察:病鸡呼吸困难,伸颈张口,精神沉郁,闭眼昏睡,眼睛下陷,脚趾干枯,羽毛松乱,食欲下降,怕冷喜欢扎堆,突出表现是排出一种白色似石灰浆糊状的稀粪,粪便粘附在肛门周围的羽毛上,由于粪便糊住了肛门,雏鸡排便时感到疼痛而发出尖叫声,有的可见关节肿大,跛行,发病率达到了70%左右,死亡率达到40%左右。
剖检变化:心包增厚,整个心脏被黄白色的纤维素性渗出物包裹,心脏上可见灰白色坏死小点或小结节略突出脏器表面,肝脏肿大,并可见点状出血或灰白色针尖状的灶性坏死点,胆囊扩张充满胆汁,脾脏肿大,质地脆弱,卵黄吸收不良,内容物呈奶油状或干酪样粘稠物。肺脏可见坏死或灰白色结节,肾脏充血肿大,充满白色结晶,像“花斑肾”,输尿管显着膨大,里面充满白色尿酸盐结晶物,肠道呈卡他性炎症,盲肠扁桃体肿大出血,盲肠出现干酪样栓子。根据临床症状剖检病变,病原分离,动物回归试验,生化试验,平板凝集试验,诊断为鸡白痢沙门氏菌病,用药敏试验筛选出敏感药物——头孢曲松,按1.5
倍的治疗量饮水,同时水中加肾肿解毒药,速溶性多种维生素。病鸡从第二天开始病情明显改善,死亡鸡只每天减少,到第7
天鸡只基本正常,没有再出现鸡只死亡。现将研究情况汇报如下:1. 材料1.1
病料来源

对山西省临汾市的某肉种鸡场疑似鸡白痢病的病死鸡进行剖检,无菌采集典型病变的心、肝、肺等病料进行病原分离。1.2试剂、仪器
培养基:营养琼脂、营养肉汤购自北京双旋微生物培养基制造场;S·S
琼脂培养基购自广东环凯微生物科技公司。标准抗原:鸡白痢沙门氏菌的标准多价阳性血清,鸡白痢标准抗原均购自中国兽药监察所。仪器VITEX32全自动生化分析仪,法国制造。药敏纸片:购自北京天坛药物生物技术开发公司。1.3
实验动物
由太原市小店区某肉种鸡场提供5 日龄肉雏鸡共120 只。2. 方法2.1
细菌分离培养
无菌采集病变明显的心脏,肝脏,划线接种于S·S
琼脂平板上37℃恒温培养,18~24
小时后取典型的红色菌落接种于营养琼脂平板上,37℃恒温纯化培养12~18
小时后将纯化的细菌接种于营养肉汤里,37℃恒温培养18~24
小时放4℃冰箱保存备用。用接种针将细菌穿刺接种于半固体培养基中,观察细菌有无动力。2.2
细菌形态学观察
对纯化的细菌进行涂片,火焰固定,革兰氏染色,镜检,观察细菌的形态及染色特征。2.3动物回归实验
用分离到的纯化的病菌按107~1010
稀释后采用营养琼脂平板散布法做活菌计数计算每毫升的平均活菌量,把细菌用生理盐水稀释成10×109cfu/ml
的悬液。取60 只饲养到5 日龄的肉雏鸡分为两组,每组30
只,实验组肉雏鸡口服菌液2ml/只,对照组肉雏鸡口服生理盐水2ml/只。分开饲养观察发病和死亡症状,连续观察7天记录结果,取死亡鸡只无菌采集心肝肺划线接种于S·S
琼脂平板上,37℃恒温培养18~24
小时,取典型的红色菌落接种于营养琼脂试管斜面上,37℃恒温培养18~24
小时做好标记,放4℃冰箱保存备用,再取60 只5
日龄的肉雏鸡重复以上实验,对比两次实验的结果。2.4生化试验取已分离纯化的菌株和两次动物回归实验的菌株用VITEX32
全自动生化分析仪进行分析鉴定。2.5平板凝集试验 取这三种菌液各50ul
与等量的鸡白痢沙门氏菌多价阳性血清做平板凝集试验,呈显颗粒凝集的为阳性反应。随机抽检100
只肉种鸡,采集血清用标准鸡白痢抗原进行平板凝集试验,呈显颗粒凝集的为阳性反应。计算其阳性率。2.6药敏试验
采用纸片扩散法对分离到的鸡白痢沙门氏菌分别用青霉素、链霉素、丁胺卡那霉素,氨苄青霉素、磷霉素、庆大霉素、环丙沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、氟哌酸、恩诺沙星、头孢曲松、头孢噻肟、安普霉素、多粘菌素B、多西环素、阿莫西林、利福平、红霉素、磺胺嘧啶等药物进行药敏试验,用游标卡尺测量抑菌圈直径大小作为判断药物敏感性的标准。3.
结果与分析3.1 分离培养结果
分离的病原菌在S·S
琼脂平板上长出细小、红色、光滑湿润、圆形半透明大小为1
毫米的菌落。半固体培养基中,细菌只沿穿刺线生长,而且越往下生长的越少,周围培养基清澈透明,证明该菌无运动力。3.2
形态特征
挑取S·S
琼脂平板上的单个菌落,涂片、火焰固定、革兰氏染色、镜检可见红色、着色均一、单个或成对的两端浑圆的小直杆菌,无荚膜,无芽孢。符合鸡白痢沙门氏菌特征。3.3
动物回归试验结果

两次动物回归试验,试验组鸡只发病症状及剖检症状相似,同肉种鸡场的病、死鸡外表状态及剖检症状均一致,两组分离的病原菌在S·S
琼脂平板上长出细小、红色、光滑湿润、圆形半透明大小为1毫米的菌落。挑取S·S
琼脂平板上的单个菌落,涂片、革兰氏染色、镜检,两组分离的病原菌同接种的病原菌形态,大小相似。动物回归试验结果与实际发病情况相一致。两组试验的生理盐水对照组均生长良好,没有发病鸡只。3.4生化试验结果三株病原菌生化试验结果一致是同一种菌,符合鸡白痢沙门氏菌特征。3.5
平板凝集试验结果

三株细菌与标准鸡白痢沙门氏菌多价阳性血清均发生颗粒凝集反应,平板凝集试验为阳性,证明这三株细菌为鸡白痢沙门氏菌。肉种鸡平板凝集试验阳性率为15%,证明本肉种鸡场鸡白痢未净化干净。3.6
药敏试验结果
抑菌圈直径为15 毫米以上判为高敏,10~14毫米为中敏,10
毫米以下判为耐药。高敏的药物有头孢曲松、头孢噻肟、磷霉素、丁胺卡那霉素、安普霉素。中敏的药物有多粘菌素B、氧氟沙星,其余的药物为耐药。4.
综合防治4.1 药物治疗

根据药敏试验结果用头孢曲松按治疗量的1.5倍饮水治疗,同时水中加肾肿解毒药及速溶性多种维生素。病鸡第二天开始病情明显改善,死亡鸡只每天减少,到第7天鸡只基本正常,没有死亡鸡只。4.2
环境消毒
搞好饲养场的环境卫生消毒,发病期间用1%的苯酚每日消毒一次,连续5
天,以后隔日一次。4.3
控制肉雏鸡的饲养密度和鸡舍的保温,同时要保障通风换气,提高饲养环境质量。4.4
做好各种疫病的预防和控制,用0.5%的过氧乙酸带鸡消毒,每3
天进行一次喷雾消毒,按照防疫程序及时接种疫苗。5. 小结与讨论5.1
本病的传染源主要为病鸡和带菌鸡。传播途径有水平传播和垂直传播,本鸡场雏鸡鸡白痢病的这次爆发与种母鸡的鸡白痢病有很重要的关联,本种鸡场鸡白痢病的阳性检出率为15%。带菌公鸡可通过精液将病原传给母鸡,母鸡又可通过垂直传播污染种蛋,所以雏鸡就感染了鸡白痢病,造成了很大的经济损失,因此对种鸡的鸡白痢净化和对种蛋彻底进行消毒,是控制该病发生的重要措施,对预防雏鸡白痢尤为重要,雏鸡用敏感药物预防对本病有很好的控制作用。种鸡鸡白痢净化:开产前一次,产蛋高峰一次,350
日龄再检一次,可采用快速平板凝集法全群检疫,淘汰阳性鸡只,可疑鸡只隔离饲养,再进行复检,阳性者淘汰。5.2
坚持自繁自养,如确需引进,需对引进鸡场进行鸡白痢检测咨询,确定为无鸡白痢鸡群,方可引进。5.3
对孵化种蛋进行全出全进制,对种蛋进行严格的熏蒸消毒,每次出完雏鸡以后,对孵化器进行彻底消毒,以便杀灭环境中的细菌。5.4
各种应激因素:如饲养密度大,通风不良,舍内温度过高或过低,卫生条件不良,饲养管理不善都可诱发鸡只发病,应减少应激因素,改善饲养管理,提高雏鸡的营养水平,加强鸡只抵抗力。5.5
对种鸡和雏鸡不要乱投药,应根据药敏试验结果选择敏感药物防治鸡白痢,注意耐药菌株的出现,要定期给种鸡投药,并对鸡舍消毒,消除鸡白痢沙门氏菌带菌污染,若一个种鸡场鸡白痢净化后未进行鸡舍消毒,不出一个月必将导致鸡白痢沙门氏菌的污染,重新检测时鸡白痢阳性率增高。

蛋鸡沙门氏菌病是由某些特定血清型沙门氏菌所引起的一类常见多发病的总称,不仅严重危害蛋鸡的健康,给养鸡场造成严重经济损失,而且污染鸡蛋,对人类健康产生较大危害。本文从鸡沙门氏菌病的病原特性、流行特点、诊断方法和综合防治等方面加以分析,为更有效地防控该病提供科学依据。

一、病原特性

鸡沙门氏菌是肠杆菌科的一属,该属细菌抗原结构复杂,目前共发现四千多个血清型,我国已报道的血清型有240种以上。在自然条件下,沙门氏菌的抵抗力较强,在土壤中可以存活14个月,在鸡舍内可以生存到第二年。但是,沙门氏菌不耐热,煮沸5分钟可杀死,70℃20分钟也可致死,高锰酸钾溶液、甲酚皂溶液、甲醛溶液和苯酚等消毒液都能迅速将其杀死。鸡沙门氏菌是胞内寄生菌,易产生耐药性,当遇到抗生素、磺胺类等药物的攻击时,可躲进动物体细胞内避开药物的作用,使该病难以治愈。

二、流行特点

奥门永利总站网址,鸡副伤寒通常引起成年鸡发生急性或慢性败血病,但以雏鸡死亡率为高。鸡副伤寒沙门氏菌主要感染雏鸡和火鸡,在孵化器内感染较多,1月龄以上的鸡有较强的抵抗力,青年鸡和成年鸡很少发生急性副伤寒。鸡副伤寒沙门氏菌感染的特征是细菌在肠道无症状性定殖,有时持续到屠宰导致加工的胴体污染,因此鸡副伤寒容易导致人类食源性疾病的发生。

近年来,由于密集饲养、鸡品种易感性差异、病原菌的毒力与嗜性不同、并发感染和各种应激因素的影响,使以往主要感染雏鸡的鸡白痢沙门氏菌出现了易感日龄增大和临床病型多样化的趋势,导致整个养鸡周期都受危害,严重影响产蛋率;且可垂直传播,几乎无法彻底消除。

沙门氏菌病严重降低了鸡群的均匀度,(www.nczfj.com)病程延续到成年鸡时,可造成蛋鸡推迟开产,同时产蛋率降低20%左右,没有产蛋高峰,蛋壳质量不好,破损蛋增多,给养鸡户带来较大的损失,对种鸡而言,种蛋的受精率、孵化率降低,雏鸡死亡率也高。

、诊断方法

鸡沙门氏菌病的检测方法很多,包括血清学鉴定、平板凝集法、卵黄琼脂扩散试验、酶免疫测定法、ELISA法、等位基因特异性PCR技术、单克隆抗体和LPS敏化RBC等,但基层最为常用的检测方法是平板凝集法。生产实践中,人们在平板凝集试验基础上做了一定的改进,获得了更简便、实用、快速的凝集试验法,例如:利用稀释血清凝集反应的方法有试管法、血清平板凝集法、卵黄平板凝集法、微孔板凝集法;利用全血反应的有纸片法和全血平板凝集法等,产蛋鸡群还可用卵黄琼脂扩散试验检测抗体。进行蛋鸡净化检验时,可根据饲养条件、日龄、血清抗体的消长规律,选用不同血清学方法。

四、综合防治

  1. 做好鸡群净化

有条件的养殖场要坚持自繁自养,谨慎从外地引进种蛋。小规模养殖户,要选择正规种鸡场购买雏鸡,尽量不要从外地购买青年鸡。临床上,因引进的青年鸡未做免疫和隐性感染而导致发病的情况时有发生。对健康种鸡群,每年春、秋两季要定期用血清凝集试验进行全面检疫和不定期进行抽查检疫。对40日龄以上的中雏,也可进行检疫,以淘汰阳性鸡和可疑鸡。

  1. 做好环境消毒

鸡舍内要进行严格的消毒,正常情况下每周消毒1次,发病情况下每周消毒2次,在免疫前后3天不消毒。鸡舍腾空后要彻底清扫,洗刷和消毒用具,而后熏蒸消毒。消毒后至少闲置2周以上才可进鸡。进鸡前5天再熏蒸消毒1次。蛋鸡消毒常用的药物有0.3%过氧乙酸、0.1%新洁尔灭和0.1%次氯酸钠等。

3.加强饲养管理

蛋鸡场应重视饲养管理,合理配制饲料,提高雏鸡营养水平,并提供合适的光照、温度和通风,减少应激因素,提高蛋鸡的抵抗力。若发现患鸡,要立即隔离消毒。调查结果表明,不同鸡舍感染率也有差异,饲养管理条件相对落后、预防措施不完善的养鸡场发病率明显高于标准鸡场。

  1. 配合药物治疗

多数种鸡养殖企业采用定期投喂大剂量抗菌药物来暂时性预防鸡沙门氏菌病的发生。例如,在鸡白痢易感期,用0.02%呋喃唑酮饮水,或在雏鸡粉料中按0.02%的比例拌入呋喃唑酮或按0.5%的比例加入磺胺类药物,有利于控制鸡白痢的发生。成年鸡可首选庆大霉素、氯霉素、新霉素、卡那霉素和诺氟沙星等,按使用说明饮水或混料喂服,可获得较好的疗效,但迄今尚未发现任何一种或几种药物能够使沙门氏菌病从鸡群中清除。近年来,鸡沙门氏菌耐药性菌株明显增多,因此建议养殖户不要盲目用药,要根据药敏试验结果选择敏感药物及时投喂,或者选择中药治疗:雄黄10%、藿香10%、滑石10%、白头翁10%、马齿苋15%、黄柏15%、马尾莲15%、诃子15%,共为细末,按日粮的5%添加,治愈率较高;或用大蒜捣泥,加5倍量清水调和,0.5~1毫升/天,分3~4次滴服,疗效显著。

目前,鸡沙门氏菌病还没有有效的疫苗,因此要在全国范围内加以防范,以血清凝集试验进行定期检疫,淘汰阳性鸡和认真执行兽医卫生综合防治措施,同时在育雏、育成和产蛋阶段,选择敏感药物及时投喂。具体到各养鸡场,则应制订和实施严格的卫生管理制度,做好沙门氏菌病的防治和净化工作。

﹡基金项目:邢台学院2012年度校级科研专项课题;邢台市科技支撑项目

(作者联系地址:宫彬彬 邢台学院 邮编:054001 ;

刘 慧 河北省邢台市农业局 邮编:054000)

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